細胞遷移和侵襲實驗
活體細胞通常都具有一定的遷移能力，不同細胞的遷移能力不同。與遷移相類似的能力是侵襲，具有裂解細胞基質的能力的細胞通常具有較強的侵襲能力。大部分腫瘤細胞的遷移能力較強，這也是反應腫瘤細胞體內發(fā)生轉移的一個重要指標。通常會先對細胞的遷移能力進行檢測，進一步再觀察該細胞是否具有侵襲能力。在進行遷移和侵襲實驗過程中，我們會選擇多種方法在不同的時間點進行檢測。綜合判斷某種細胞的遷移和侵襲能力。
細胞遷移和侵襲實驗步驟
一、將小室放入培養(yǎng)板中，在上室加入300 ?l預溫的無血清培養(yǎng)基，室溫下靜置15－30 min，使基質膠再水化。再吸去剩余培養(yǎng)液。
二、制備細胞懸液
三、接種細胞
測量外泌體的粒徑分布一直以來都是外泌體表征的重要組成部分。但是由于外泌體的尺寸僅為30~200 nm，所以必須借助一些特殊的檢測手段才能夠對這種在光學顯微鏡下不可視的顆粒進行觀測。本篇就外泌體粒徑測量技術的發(fā)展進行簡述，并對不同技術的差異進行比較。
在外泌體發(fā)現(xiàn)的早期，由于還沒有專門針對這類尺寸顆粒的分析方法，因此直接在電鏡下面觀察粒徑并統(tǒng)計成為了最早的外泌體粒徑統(tǒng)計方法。
由于外泌體與材料學所合成的脂質體在形態(tài)上十分相似，因此用于脂質體表征的動態(tài)光散射技術（DLS）便被應用于外泌體的尺寸測量上。DLS利用光射到遠小于其波長的小顆粒上時會產(chǎn)生瑞利散射現(xiàn)象，通過觀察散射光的強度隨時間的變化推算出溶液中顆粒的大小。但是這種技術會受到測量物質的顏色、電性、磁性等理化特性的影響，并且對于灰塵和雜質十分敏感。因此使得DLS在測量尺寸較小的粒子時，測量出的粒徑與實際的分布具有較大的偏差。
為了彌補DLS的短板，納米粒子跟蹤分析（NTA）技術孕育而生。這種技術采用激光散射顯微成像技術，用于記錄納米粒子在溶液中的布朗運動軌跡，并通過Stokes-Einstein方程推算粒子大小。這種技術能夠對30~1000 nm的粒徑進行測量，因此能夠提供更為精確的粒徑數(shù)據(jù)。在諸多文獻的測試中均取得了較DLS更好的精度，因此成為目前最為主流的外泌體尺寸測量手段。
