基本結(jié)構(gòu)
掃描電鏡主要是由電子光學(xué)系統(tǒng)和顯示單元組成，它是由電子槍、磁透鏡、掃描線圈以及樣品室組成。電子槍與透射電鏡的電子槍基本相同，只是加速電壓較低，一般在40kV以下。
磁透鏡有第一、二聚光鏡和物鏡，其作用與透射電鏡的聚光鏡相同：縮小電子束的直徑，把來自電子槍的約30μm大小的電子束經(jīng)過第一、二聚光鏡和物鏡的作用，縮小成直徑約為幾十埃的狹窄電子束。
這是由于掃描電鏡的分辨率主要取決于電子束的直徑，所以要盡可能縮小它，為此，物鏡還裝備有物鏡可動光欄和消散器。一個帶有掃描電路的偏轉(zhuǎn)線翻通以鋸齒波的電流，產(chǎn)生的磁場作用于電子束使它在樣品上掃描。
掃描電鏡的真空系統(tǒng)也與透射電鏡的真空系統(tǒng)相似，由機械泵、擴散泵、檢測系統(tǒng)、管道及閥門等組成。樣品室位于鏡筒的底部。為了能觀察大塊樣品，樣品室是大于透射電鏡的。與透射電鏡一樣，掃描電鏡的鏡筒也有一套合軸調(diào)整裝置，但相對比較簡單。
顯示系統(tǒng)包括信號的收集、放大、處理、顯示與記錄部分。顯示和記錄部分包括兩個顯像管和照相機。一個顯像管是長余輝的，用于觀察;另一顯像管是高分辨率的、短余輝的，用于照相。
掃描電鏡樣品的處理過程：
主要包括表面清潔、固定、漂洗和脫水等過程，基本上與透射電鏡樣品的處理方法相似,但也有其特殊之處。
1. 樣品大小 所切取樣品比透射電鏡樣品稍大一些，為8～10mm2，高約5mm。
2. 清潔表面 清潔表面并充分暴露樣品表面。常用清洗液有蒸餾水、生理鹽水、緩沖液及含酶的清洗液等。
3. 固定和脫水 常用的固定方法是戊二醛-四氧化餓雙重固定，也可用戊二醛單固定法。
常用脫水劑是乙醇或丙酮。脫水劑濃度梯度增加，從30%或50%開始至100%進行脫水；易變形樣品脫水劑濃度梯度宜緩慢遞增。
4. 樣品的干燥 脫水后，需要將樣品中的脫水劑*揮發(fā)干凈，即樣品干燥。其方法有：空氣干燥 、真空干燥、冷凍干燥和臨界點干燥。
5. 樣品表面導(dǎo)電處理 用金屬鍍膜法和組織導(dǎo)電處理技術(shù)，一是可增強導(dǎo)電能力，消除荷電效應(yīng)；二是增加樣品表面二次電子發(fā)射率，加強訊號，提高圖像反差。
?。?）金屬鍍膜：使樣品表面覆蓋薄層金屬膜，這層薄膜與樣品表面的凹凸形態(tài)*一致，使標(biāo)本表面的形貌得以反映。常用的金屬有金、鉑、鉬、或金/鉑、鉑/銫合金。鍍膜的方法有真空鍍膜法和離子濺射法。
?。?）組織導(dǎo)電技術(shù)：其目的是為提高導(dǎo)電率克服生物材料的荷電效應(yīng)，提高樣品表面二次電子發(fā)射率。組織導(dǎo)電處理也稱導(dǎo)電染色，是利用某些金屬鹽類能與生物材料中的蛋白質(zhì)、脂類和淀粉等結(jié)合，使樣品表面離子化，使組織導(dǎo)電性增加；并且提高二次電子的發(fā)射率。可用醋酸鈾、碘化鉀、丹寧酸等處理標(biāo)本。
